在食品安全檢測(cè)中應(yīng)用ATCC8739大腸桿菌時(shí)，需要注意以下幾方面問(wèn)題：

菌株的保存與復(fù)蘇

保存條件：應(yīng)嚴(yán)格按照要求在-20°C以下密閉保存凍干品，以保證菌株的活性和穩(wěn)定性，避免因保存溫度不當(dāng)導(dǎo)致菌株死亡或變異。

復(fù)蘇操作：復(fù)蘇時(shí)要使用合適的培養(yǎng)基和正確的操作方法。例如采用 MH 培養(yǎng)基或 TSB 培養(yǎng)基，在 37℃有氧條件下進(jìn)行培養(yǎng)。

防止污染：無(wú)論是保存還是復(fù)蘇過(guò)程，都要防止其他雜菌的污染。接種過(guò)程應(yīng)在生物安全柜中進(jìn)行，使用的器材和試劑都要經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的滅菌消毒。

實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程

無(wú)菌操作：整個(gè)檢測(cè)過(guò)程必須嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作原則，防止引入其他雜菌影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。操作人員要做好個(gè)人防護(hù)和實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔消毒，使用的儀器設(shè)備、培養(yǎng)皿、移液管等都要經(jīng)過(guò)滅菌處理。

準(zhǔn)確接種：接種時(shí)要確保接種量準(zhǔn)確、均勻，避免接種量過(guò)多或過(guò)少影響檢測(cè)結(jié)果的判定。同時(shí)，要注意接種的方式和部位，保證菌株能夠在培養(yǎng)基上良好生長(zhǎng)。

培養(yǎng)條件控制：嚴(yán)格控制培養(yǎng)溫度、時(shí)間和氣體環(huán)境等條件。ATCC8739大腸桿菌的適宜培養(yǎng)溫度為 37℃，需根據(jù)具體的檢測(cè)方法和要求，準(zhǔn)確控制培養(yǎng)時(shí)間，以確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性。

檢測(cè)方法的選擇與驗(yàn)證

方法適用性：根據(jù)不同的食品樣品類型和檢測(cè)目的，選擇合適的檢測(cè)方法。常見的檢測(cè)方法包括多管發(fā)酵法、濾膜法、平板計(jì)數(shù)法、氣相色譜法、高效液相色譜法、ATP 生物發(fā)光技術(shù)、PCR 檢測(cè)技術(shù)等，各方法都有其優(yōu)缺點(diǎn)和適用范圍，需綜合考慮后選擇。

方法驗(yàn)證：在使用選定的檢測(cè)方法前，要進(jìn)行方法驗(yàn)證，確保該方法能夠準(zhǔn)確、可靠地檢測(cè)出ATCC8739大腸桿菌。驗(yàn)證內(nèi)容包括檢測(cè)限、回收率、精密度、準(zhǔn)確度等指標(biāo)，以保證檢測(cè)結(jié)果的有效性。

質(zhì)量控制與結(jié)果判定

陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照：設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照是保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的重要措施。陽(yáng)性對(duì)照應(yīng)使用已知的ATCC8739大腸桿菌菌株，陰性對(duì)照則使用無(wú)菌水或其他無(wú)大腸桿菌污染的樣品，通過(guò)對(duì)照實(shí)驗(yàn)可以排除實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果。

結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：熟悉并嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行判定。不同的檢測(cè)方法和食品類型可能有不同的判定標(biāo)準(zhǔn)，例如在菌落計(jì)數(shù)法中，要根據(jù)規(guī)定的稀釋度和菌落數(shù)范圍來(lái)確定食品中大腸桿菌的含量是否超標(biāo)。